Aon cheum gu sgiobalta RT-qPCR Probe Premix-UNG
Àireamh cat: HCR5143A
Tha One Step RT-qPCR Probe Kit (FOR FAST) na inneal lorg luath RT-qPCR stèidhichte air probe a tha freagarrach airson PCR cainneachdail aon-plex no ioma-fhillte a’ cleachdadh RNA mar theamplaid (leithid bhìoras RNA).Bidh an toradh seo a’ cleachdadh ginealach ùr de Taq DNA Polymerase atharraichte le antibody agus Reverse Transcriptase aon-cheum coisrigte, le bufair làn-leasaichte airson leudachadh luath, aig a bheil astar leudachaidh nas luaithe, èifeachdas leudachaidh nas àirde agus sònrachas.Bidh e a’ toirt taic do leudachadh cothromach an dà chuid ann an aon-plex agus ioma-fhillte de shampaill dùmhlachd ìosal is àrd ann an ùine ghoirid.
Co-phàirtean
1. 5 × bufair RT-qPCR (U+)
2. Measgachadh einnsein (U+)
Notaichean:
a.Tha bufair 5 × RT-qPCR (U +) a’ toirt a-steach dNTP agus Mg2+;
b.Tha measgachadh enzyme (U +) a’ toirt a-steach transcriptase cùil, Hot Start Taq DNA polymerase, inhibitor RNase agus UDG;
c.Cleachd molaidhean gun RNase, tiùban EP, msaa.
Mus tèid a chleachdadh, measgachadh gu mionaideach am bufair 5 × RT-qPCR (U+).Ma tha sileadh sam bith ann às deidh leaghadh, feitheamh ris a’ bhufair tilleadh gu teòthachd an t-seòmair, measgachadh agus sgaoileadh, agus an uairsin cleachd iad gu h-àbhaisteach.
Cumhachan stòraidh
Tha an toradh air a chuir air falbh le deigh thioram agus faodar a stòradh aig -25 ~ -15 ℃ airson 1 bliadhna.
Stiùiridhean
1. Reachd Siostam
Co-phàirtean | Meud (20 μL freagairt) |
2 × RT-qPCR bufair | 4 µL |
Measgachadh einnsein (U+) | 0.8 μL |
Primer air adhart | 0.1 ~ 1.0 μM |
Tilleadh Primer | 0.1 ~ 1.0 μM |
Rannsachadh TaqMan | 0.05 ~ 0.25 μM |
Teamplaid | X l |
Uisge gun RNase | suas gu 25 μL |
Notaichean: Is e meud freagairt 10-50μL.
2. Pròtacal Rothaireachd (Sàbhaisteach)
Rothaireachd ceum | Temp. | Uair | Rothaichean |
Ath-sgrìobhadh air ais | 55 ℃ | 10 mion | 1 |
Dì-nàdarachadh tùsail | 95 ℃ | 30 diog | 1 |
Dì-nàdarachadh | 95 ℃ | 10 diog | 45 |
Annealing/Leudachadh | 60 ℃ | 30 diog |
Pròtacal Rothaireachd (luath) Rothaireachd ceum |
Temp. |
Uair |
Rothaichean |
Ath-sgrìobhadh air ais | 55 ℃ | 5 min | 1 |
Dì-nàdarachadh tùsail | 95 ℃ | 5 s | 1 |
Dì-nàdarachadh | 95 ℃ | 3 s | 43 |
Annealing/Leudachadh | 60 ℃ | 10 s |
Notaichean:
a.Tha teòthachd tar-chuir air ais eadar 50 ℃ gu 60 ℃, ag àrdachadh an teòthachd a ’cuideachadh le bhith ag àrdachadh structaran iom-fhillte agus teamplaidean susbaint CG àrd;
b.Feumar an teòthachd annealing as fheàrr atharrachadh a rèir luach Tm a’ phrìomhaire, agus tagh an ùine as giorra airson cruinneachadh comharran flùraiseach stèidhichte air an ionnstramaid PCR Real Time.
Notaichean
Feuch an cuir thu ort am PPE riatanach, a leithid de chòta obair-lann agus miotagan, gus do shlàinte is do shàbhailteachd a dhèanamh cinnteach!