Ultra Nuclease
Tha UltraNuclease na enddonuclaese innleadaichte gu ginteil a thàinig bho Serratia marcescens, a tha comasach air DNA no RNA a dhì-mhilleadh, an dàrna cuid sreath dùbailte no singilte, sreathach no cearcallach fo raon farsaing de chumha, gu tur a’ lughdachadh searbhagan niuclasach gu oligonucleotides 5’-monophosphate le fad 3-5base. .Às deidh atharrachadh innleadaireachd ginteil, chaidh an toradh a choipeadh, a chuir an cèill, agus a ghlanadh ann an Escherichia coli (E. coli), a lughdaicheas slaodachd supernatant cealla agus sgrùdadh inscientific cealla lysate, ach cuideachd a leasaicheas èifeachdas glanaidh agus sgrùdadh gnìomh pròtain.Faodar a chleachdadh cuideachd ann an gine therapy, glanadh bhìoras, cinneasachadh banachdach, gnìomhachas cungaidh pròtain agus polysaccharide mar inneal toirt air falbh searbhag niuclasach fuigheall aoigheachd.
Feartan toraidh
CAS Àir. | 9025-65-4 |
EC Àir. | |
Cuideam Molecular | 30kda |
Rubha Isoelectric | 6.85 |
Purity Protein | ≥99% (SDS-PAGE & SEC-HPLC) |
Gnìomh Sònraichte | ≥1.1 × 106U/mg |
An teòthachd as fheàrr | 37°C |
pH as fheàrr | 8.0 |
Gnìomhachd Protease | àicheil |
Bith-eallach | <10CFU/100,000U |
Pròtain cealla aoigheachd iarmharach | ≤10 ppm |
Meatailt Trom | ≤10 ppm |
Endotoxin bacteriach | <0.25EU/1000U |
Bufair stòraidh | 20mM Tris-HCl, pH 8.0, 2mM MgCl2 , 20mM NaCl , 50% glycerol |
Suidheachadh stòraidh
≤0 ° C còmhdhail ;-25 ~ -15 ° C Stòradh, dligheachas 2 bhliadhna (seachain reothadh-leaghadh).
Mìneachadh Aonad
Chaidh an ìre de enzyme a chaidh a chleachdadh gus luach in-ghabhail △A260 atharrachadh le 1.0 taobh a-staigh 30min aig 37 ° C, pH 8.0, co-ionann ri DNA sperm bradan 37μg a chaidh a chnàmh le bhith a’ gearradh gu oligonucleotides, a mhìneachadh mar aonad gnìomhach (U).
Smachd càileachd
Pròtain cealla aoigheachd iarmharach: Kit ELISA
•Protease Fuigheall: Fhreagair 250KU / mL UltraNuclease le substrate airson 60min, cha deach gnìomhachd sam bith a lorg.
•Endotoxin bacteriach: LAL-Test, Pharmacopoeia de Phoblachd Sluagh na Sìona Leabhar 4 (Deasachadh 2020) modh deuchainn crìoch gel.Riaghailtean Coitcheann (1143).
•Bith-eallach: Pharmacopoeia Poblachd Sluagh na Sìona Leabhar 4 (Deasachadh 2020) - Coitcheann
Riaghailtean airson Deuchainn Sterility (1101), Inbhe Nàiseanta PRC, GB 4789.2-2016.
•Meatailt Trom:ICP-AES, HJ776-2015.
Obrachaidh
Chaidh gnìomhachd UltraNuclease a bhacadh gu mòr nuair a bha dùmhlachd SDS os cionn 0.1% no EDTA
cha robh an dùmhlachd os cionn 1mM.Surfactant Triton X- 100, Tween 20 agus Tween 80 buaidh sam bith air nuclease
togalaichean nuair a bha an dùmhlachd fo 1.5%.
Obrachaidh | Obrachadh as Fheàrr | Obrachadh dligheach |
Teòthachd | 37 ℃ | 0-45 ℃ |
pH | 8.0-9.2 | 6.0- 11.0 |
Mg2+ | 1-2m | 1- 15mM |
DTT | 0- 100mM | >100mM |
2-Mercaptoethanol | 0- 100mM | >100mM |
Ian meatailt monovalent (Na+, K+ etc.) | 0-20mM | 0-200mM |
PO43- | 0- 10mM | 0- 100mM |
Cleachdadh agus Dosage
• Thoir air falbh searbhag niuclasach exogenous bho thoraidhean banachdach, lughdaich cunnart puinnseanta searbhag niuclasach iarmharach agus leasaich sàbhailteachd toraidh.
• Lùghdaich slaodachd leaghan biadhaidh air adhbhrachadh le searbhag niuclasach, giorraich ùine giollachd agus àrdaich toradh pròtain.
• Thoir air falbh an t-searbhag niuclasach a tha a' pasgadh mìrean (bhìoras, corp in-ghabhail, msaa), a tha cuideachail
ri sgaoileadh agus glanadh a’ mhàthar.
Seòrsa deuchainneach | Riochdachadh pròtain | Bhìoras, banachdach | Drogaichean cealla |
Àireamh cheallan | cuideam fliuch cealla 1g (air a chuir air ais le bufair 10ml) | 1L coipeadh leaghan supernatant | 1L cultar |
Dosage as ìsle | 250U | 100U | 100U |
Dosage air a mholadh | 2500U | 25000U | 5000U |
• Faodaidh làimhseachadh niuclasach leasachadh a thoirt air fuasgladh agus faighinn air ais an t-sampall airson cromatagrafaidheachd colbh, electrophoresis agus mion-sgrùdadh sèididh.
• Ann an leigheas gine, thèid searbhag niuclasach a thoirt air falbh gus bhìorasan co-cheangailte ri adeno-ghlan fhaighinn.