Bst 2.0 DNA Polymerase (saor bho glycerol, dùmhlachd àrd)
Tha Bst DNA polymerase V2 a’ tighinn bho Bacillus stearothermophilus DNA Polymerase I, aig a bheil gnìomhachd DNA polymerase 5 ′ → 3 ′ agus gnìomhachd ath-chuiridh slabhraidh làidir, ach gun ghnìomhachd exonuclease 5 ′ → 3 ′.Tha Bst DNA Polymerase V2 air leth freagarrach airson gluasad dualan, leudachadh isothermal LAMP (leudachadh isothermal le meadhan lùb) agus sreath luath.Tha am Bst DNA polymerase V2 seo comasach air casg a chuir air gnìomhachd DNA polymerase aig teòthachd an t-seòmair, gus an urrainnear a ruith agus an siostam ath-bhualadh a dhealbhadh aig teòthachd an t-seòmair, casg a chuir air leudachadh neo-shònraichte agus leasachadh èifeachdas an ath-bhualadh, agus faodaidh an dreach seo bhi lyophilized.A bharrachd air an sin, tha e comasach air a ghnìomhachd a leigeil ma sgaoil aig teòthachd àrdaichte, mar sin a ’cur às don fheum air ceum gnìomhachaidh air leth.
Co-phàirtean
Comh-phàirt | HC5007A-01 | HC5007A-02 | HC5007A-03 |
Bst DNA polymerase V2 (Gun glycerol) (32U / μL) | 0.05 ml | 0.25 mL | 2.5 mL |
Bufair 10 × HC Bst V2 | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 3 × 10 mL |
MgSO4 (100mM) | 1.5 mL | 2 × 1.5 mL | 2 × 10 mL |
Iarrtasan
1.Meudachadh isothermal LAMP
2.Freagairt gluasad singilte sreath DNA
3.Seicheamh gine àrd GC
4.Seicheamh DNA de ìre nanogram.
Suidheachadh stòraidh
Còmhdhail fo 0 ° C agus a bhith air a stòradh aig -25 ° C ~ -15 ° C.
Mìneachadh Aonad
Tha aon aonad air a mhìneachadh mar an ìre de enzyme a tha a’ toirt a-steach 25 nmol de dNTP a-steach do stuth searbhagach do-fhuasgladh ann an 30 mionaid aig 65 ° C.
Freagairt LAMP
Co-phàirtean | 25 μLSiostam |
Bufair 10 × HC Bst V2 | 2.5 μL |
MgSO4 (100mM) | 1.5 μL |
dNTPs (10mM gach) | 3.5 μL |
SYTO™ 16 Uaine (25×)a | 1.0 μL |
Measgachadh primerb | 6 μL |
Bst DNA Polymerase V2 (Gun glycerol) (32 U / uL) | 0.25 μL |
Teamplaid | × μL |
dhH₂O | Suas gu 25 μL |
Notaichean:
1) a.SYTOTM 16 Uaine (25 ×): A rèir feumalachdan deuchainneach, faodar dathan eile a chleachdadh mar luchd-ionaid;
2) b.Measgachadh primer: air fhaighinn le bhith a’ measgachadh 20 µM FIP, 20 µM BIP, 2.5 µM F3, 2.5 µM B3, 5 µM LF, 5 µM LB agus leabhraichean eile.
Freagairt agus suidheachadh
Bufair 1 × HC Bst V2, tha an teòthachd brosnachaidh eadar 60 ° C agus 65 ° C.
Neo-ghnìomhachd teas
80 ° C, 20 mionaid.