Multiplex One Step RT-qPCR Premix
Tuairisgeul
Àireamh cat: HCR5141A
Tha Multiplex One Step RT-qPCR Premix na Kit PCR cainneachdail ioma-fhillte stèidhichte air RNA mar theamplaid.Anns an deuchainn, thèid tar-sgrìobhadh cùil agus PCR cainneachdail a dhèanamh anns an aon phìob ath-bhualadh, a’ sìmpleachadh an obrachaidh deuchainneach agus a’ lughdachadh cunnart truailleadh.Faodar an dealbhadh sònraichte de mheasgachadh bufair agus enzyme a chleachdadh ann an siostam lyophilized aon-cheum.Bidh an uidheamachd a’ cleachdadh Reverse Transcriptase teas-dhìonach airson synthesis èifeachdach den chiad iallan cDNA a’ cleachdadh hotstart Taq DNA Polymerase airson leudachadh cainneachdail.Tha bufair ath-bhualadh as fheàrr ann, measgachadh enzymes msaa, agus chaidh feartan a chuir bacadh èifeachdach air leudachadh PCR neo-shònraichte agus a chuireas ri èifeachdas leudachaidh ioma ath-bheachdan qPCR, a’ comasachadh leudachadh cainneachdail ioma-fhlùraichean fhad ‘s a nì e cinnteach à èifeachdas leudachaidh primers.
Co-phàirtean
| Ainm |
| 1. Lyo-Buffer |
| 2. Lyo-Enzyme Mix |
| 3. Lyo dìonadair |
Suidheachadh còmhdhailian
A: Lyo-buffer agus protectant: -25 ~ -15 ℃, sgeilp beatha a tha 1 bliadhna.
B: measgachadh lyo-enzyme, 2-8 ℃, beatha sgeilp 6 mìosan.
Stiùireadh airson obrachadh
1. Reaction System (Gabh 25μL mar eisimpleir)
| Co-phàirtean | Meud (μL) | Tùsachadh Deireannach |
| Lyo-Buffer | 6 | 1* |
| Measgachadh lyo-enzyme | 1 | - |
| Lyo-dìon | 8 | - |
| Measgachadh Primer (10μM) | 1 | 0.1- 1uM |
| Measgachadh probe (10μM) | 0.5 | 0.05-0.5uM |
| Teamplaid RNA | 5 | - |
| DEPC H2O | Suas gu 25 | - |
2. Pròtacal Rothaireachd Optimized
1) Pròtacal Rothaireachd Coitcheann
| Ìre freagairt | Teòthachd | Uair | Rothaireachd | |
| 1 | Ath-sgrìobhadh air ais | 50°Ca | 10 mionaidean | 1 |
| 2 | Dì-nàdarachadh tùsail | 95°C | 5 mionaidean | 1 |
| 3 | Freagairt leudachaidh | 95°C | 15 diog | 45 cearcall |
| 60°Cb | 30 diogc |
2) Pròtacal Rothaireachd Luath
|
| Ìre freagairt | Teòthachd | Uair | Rothaireachd |
| 1 | Ath-sgrìobhadh air ais | 50°Ca | 2 mhionaid | 1 |
| 2 | Dì-nàdarachadh tùsail | 95°C | 2 diog | 1 |
| 3 | Freagairt leudachaidh | 95°C | 1 diog |
45 cearcall |
| 60°Cb | 13 diogc |
Thoir an aire:
a) Air ais tar-sgrìobhadh: Faodaidh an teòthachd 42 ° C no 50 ° C a thaghadh airson 10-15 mionaidean.
b) Freagairt leudachaidh: Tha an teòthachd air atharrachadh a rèir luach Tm nan primers dealbhaichte.
c)Fluaraiseachd comharradh togail: Feuch an suidhich thu am modh deuchainneach a rèir riatanasan anleabhar-làimhe inneal.
Fiosrachadh / Sònrachaidhean Teicnigeach
| Tòisich teth | Toiseach tòiseachaidh teth togte |
| Modh lorgaidh | Dearbhadh primer-probe |
| Modh PCR | Aon cheum RT-qPCR |
| Seòrsa sampall | RNA |
Notaichean
1. Tha an toradh seo airson cleachdadh rannsachaidh a-mhàin.
2. Feuch an cuir thu ort am PPE a tha a dhìth, còta obair-lann agus miotagan, gus dèanamh cinnteach gu bheil do shlàinte is sàbhailteachd！
