RT-LAMP Colormetric Master Mix HCB5204A
Anns an toradh seo tha bufair ath-bhualadh, RT-Enzymes Mix (Bst DNA polymerase agus transcriptase reverse resistant teas), Luchd-dìon lyophilized agus co-phàirtean dath chromogenic.Gus a chleachdadh, dìreach cleachd Buffer, tha an enzyme freagairt agus primer air a mheasgachadh agus air a chur ris an teamplaid;faodaidh cuir a-steach dìonadair lyophilized a bhith dìreach.Bha e ceangailte ri lyophilizer agus lyophilized, agus cha deach ach na primers agus na teamplaidean a chur ris nuair a chaidh an cleachdadh.Tha an uidheamachd seo a’ toirt seachad lorg lèirsinneach luath, soilleir air leudachadh, a tha freagairt àicheil air a nochdadh ann an dearg agus ath-bhualadh adhartach air a chomharrachadh le atharrachadh gu buidhe.
Comh-phàirt
| Comh-phàirt | HCB5204A-01 | HCB5204A-02 | HCB5204A-03 |
| Bufair leudachaidh le meadhan lùb (le dath) | 0.96 ml | 4.80 mL × 2 | 9.60 mL × 10 |
| Measgachadh RT-Enzymes | 270 μL | 2.70 mL | 2.70 mL × 10 |
| Neach-dìon lyophilized | 0.96 mL × 2 | 9.60 mL × 2 | 9.60 mL × 20 |
Iarrtasan
Airson leudachadh DNA no RNA isothermal.
Cumhachan stòraidh
Air a ghiùlan le deigh tioram, air a stòradh aig -25 ~ -15 ℃.Seachain reothadh tric, tha an toradh dligheach airson 12 mìosan.
Pròtacal
1.Leudaich am bufair ath-bhualadh airson a chleachdadh aig teòthachd an t-seòmair.Vortex goirid no cuir a-steach tiùban grunn thursan gus measgachadh gu mionaideach, an uairsin centrifuge gus an leaghan a chruinneachadh gu bonn an tiùba.
2.Ag ullachadh an t-siostam reaction.Faodar an reagent seo ullachadh ann an dà shiostam ath-bhualadh, measgachadh ath-bhualadh liùlach agus measgachadh siostam lyophilized.
1) Ullaich measgachadh ath-bhualadh lionn
| Comh-phàirt | Toirt |
| Bufair leudachaidh le meadhan lùb (le dath) | 10 μL |
| Measgachadh RT-Enzymes | 2.8 μL |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Teamplaidean DNA/RNA b | × μL |
| Uisge gun niùclas | Suas gu 50 μL |
2) measgachadh siostam lyophilization
① Ullaich measgachadh lyophilized
| Comh-phàirt | Toirt |
| Bufair leudachaidh le meadhan lùb (le dath) | 10 μL |
| Neach-dìon lyophilized | 20 μL |
| Measgachadh RT-Enzymes | 2.8 μL |
| Uisge gun niùclas | Suas gu 50 μL |
② Lyophilization: Chaidh am measgachadh ullaichte a lyophilized ann an siostam 50μL
③ Ullaich measgachadh freagairt
| Comh-phàirt | Toirt |
| Measgachadh lyophilized | 1 phìos |
| 10 × Primer Mixa | 5 μL |
| Teamplaidean DNA/RNA b | × μL |
| Uisge gun niùclas | Suas gu 50 μL |
Notaichean:
1) a.10 × Primer Mix: 16 μM FIP / BIP, 2 μM F3 / B3, 4 μM lùb F / B;
2) b.Thathas a’ moladh DEPC (solus-uisge) airson templ searbhag niuclasach.
1.Goir aig 65 ° C airson 30-45mins, a ghabhas leudachadh gu h-iomchaidh a rèir àm freagairt atharrachadh dath.
2.A rèir an t-sùil rùisgte, bha buidhe deimhinneach agus dearg àicheil.
Notaichean
1.Faodaidh salann nochdadh ann am bonn an tiùba bufair, vortex goirid no tiùban tionndaidh grunn thursan gus measgachadh gu mionaideach aig teòthachd an t-seòmair.
2.Faodar an teòthachd ath-bhualadh àrdachadh eadar 62 ℃ agus 68 ℃ a rèir suidheachadh primers.
3.Cha bu chòir na h-ath-bheachdan pacaichte a bhith fosgailte don èadhar airson ùine mhòr.
4.Tha an ath-bhualadh dath dearg is buidhe an urra ri atharrachadh pH an t-siostam ath-bhualadh, feuch nach cleachd thu am fuasgladh stòraidh searbhag niuclasach Tris, a thathar a’ moladh ddH a chleachdadh2O searbhag niuclasach air a stòradh;
5.Bu chòir an deuchainn a bhith àbhaisteach, a’ toirt a-steach ullachadh an t-siostam ath-bhualadh, lyophilization, agus giollachd sampall agus pròiseas cur-ris sampall;
6.Gus truailleadh a sheachnadh, thathas a ’moladh an siostam ath-bhualadh ullachadh ann am being ultra-ghlan, ann an cuid eile Cuir teamplaidean ri cochall ceò an t-seòmair gus casg a chuir air meallta meallta a sheachnadh.
