Einnseanan UDG/UNG
Faodaidh UDG (uracil DNA glycosylase) uisgeachadh a dhèanamh air a’ cheangal N-glycosidic eadar bonn uracil agus cnàimh-droma siùcar-fosfáit ann an ssDNA agus dsDNA.Is urrainn dha smachd a chumail air truailleadh aerosol gu furasta agus tha e freagarrach airson siostaman bith-eòlas moileciuil cumanta leithid PCR, qPCR, RT-qPCR agus LAMP.
Sònrachaidhean
| Host Express | Recombinant E. coliwith uracil DNA glycosylase gine |
| Cuideam Molecular | 24. 8kDa |
| Purity | ≥95% (SDS-DUILLEAG) |
| Neo-ghnìomhachd teas | 95 ℃, 5 ~ 10 mionaidean |
| Mìneachadh Aonad | Tha aon aonad (U) air a mhìneachadh mar an ìre de enzyme a dh’ fheumadh gus uisgeachadh l μg dU anns a bheil dsDNA ann an 30 mionaid aig 25 ℃ a ghlacadh. |
Stòradh
Bu chòir an toradh a bhith air a stòradh aig-25 ℃ ~ -15 ° C airson dà bhliadhna.
Stiùiridhean
1.Ag ullachadh measgachadh freagairt PCR a rèir an t-siostam a leanas
| Co-phàirtean | Meud (μL) | Co-chruinneachadh deireannach |
| 10 × PCR Bufair (Mg²+ Plus) | 5 | 1 × |
| 25 mmol / LMgCl | 3 | 1.5 mmol / l |
| duTP(10 mmol/L) | 3 | 0.6 mmol / l |
| dCTP/dGTP/dATP/dTTP(10mmol/Leach) | 1 | 0.2 mmol / Leach |
| DNA teamplaid | X | - |
| Primer1 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| Primer 2 (10μmol/L) | 2 | 0.4 μmol/L |
| DNA Polymerase (5 U/μL) | 0. 5 | 0. 05 U/μL |
| Uracil DNA Glycosylase (UDG / UNG), 1 U / μL | 1 | 1 U/μL |
| dhH₂O | Suas gu 50 | - |
Thoir an aire: A rèir nan riatanasan deuchainneach, faodar an dùmhlachd deireannach de dUTP atharrachadh eadar 0.2-0.6 mmol / L, agus faodar 0.2 mmol / L dTTP a chur ris gu roghnach.
2.Dòigh-obrach leudachaidh
| Ceum rothaireachd | Teòthachd | Uair | Rothaichean |
| du anns a bheil crìonadh teamplaid | 25 ℃ | 10 mionaidean | 1 |
| Gnìomhachadh UDG, teamplaid denaturation tùsail | 95 ℃ | 5 ~ 10 mionaidean | 1 |
| Dì-nàdarachadh | 95 ℃ | 10 diog |
30-35 |
| Annealing | 60 ℃ | 20 diog | |
| Leudachadh | 72 ℃ | 30 diog/kb | |
| Leudachadh deireannach | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Thoir an aire: Faodar an ùine freagairt aig 25 ° C atharrachadh taobh a-staigh 5-10mins a rèir riatanasan deuchainneach.
Notaichean
1.Tha UDG gnìomhach anns a’ mhòr-chuid de bhufairean freagairt PCR.
2.Bu chòir einnseanan a stòradh ann am bogsa-deighe no air amar-deighe nuair a thèid an cleachdadh, agus bu chòir an stòradh aig -20 ° C dìreach às deidh an cleachdadh.
3.Feuch an cuir thu ort am PPE riatanach, a leithid de chòta obair-lann agus miotagan, gus do shlàinte is do shàbhailteachd a dhèanamh cinnteach!
