Kit tarraing DNA / RNA viral
Tha am pasgan seo freagarrach airson toirt a-mach luath de DNA / RNA viral fìor-ghlan bho shamhlaichean leithid swaban nasopharyngeal, swaban àrainneachd, supernatants cultar cealla, agus supernatants homogenate clò.Tha an uidheamachd stèidhichte air teicneòlas glanaidh membran silica a chuireas às don fheum air a bhith a’ cleachdadh fuasglaidhean organach phenol / cloroform no sileadh deoch làidir a bheir ùine gus DNA / RNA viral de chàileachd àrd a thoirt a-mach.Tha na h-aigéid niuclasach a gheibhear saor bho neo-chunbhalachd agus deiseil airson an cleachdadh ann an deuchainnean sìos an abhainn leithid tar-sgrìobhadh cùil, PCR, RT-PCR, PCR fìor-ùine, sreath an ath ghinealach (NGS), agus blot a Tuath.
Suidheachadh stòraidh
Bùth aig 15 ~ 25 ℃, agus còmhdhail aig teòthachd an t-seòmair
Co-phàirtean
| Co-phàirtean | 100RXNS |
| Bufair VL | 50 ml |
| Bufair RW | 120 ml |
| Gun RNase ddH2 O | 6 ml |
| Colbhan RNA FastPure | 100 |
| Tiùban cruinneachaidh (2ml) | 100 |
| Tiùban cruinneachaidh gun RNase (1 .5ml) | 100 |
Bufair VL:Thoir seachad àrainneachd airson lysis agus ceangaltach.
Bufair RW:Thoir air falbh pròtainean a tha air fhàgail agus neo-chunbhalachd eile.
ddH2O gun RNase:Elute DNA/RNA bhon membran anns a’ cholbh snìomh.
Colbhan RNA FastPure:Gu sònraichte adsorb DNA/RNA.
Tiùban cruinneachaidh 2 ml:Cruinnich filtrate.
Tiùban cruinneachaidh gun RNase 1.5 ml:Cruinnich DNA/RNA.
Iarrtasan
Swabs nasopharyngeal, swaban àrainneachd, supernatants cultar cealla, agus supernatants homogenate clò.
Mater fèin-ullaichteiallan
Molaidhean pìobaireachd gun RNase, tiùban centrifuge 1.5 ml gun RNase, centrifuge, measgachadh vortex, agus pìoban.
Pròiseas deuchainn
Dèan na ceumannan a leanas gu lèir ann an caibineat bith-shàbhailteachd.
1. Cuir 200 μl den t-sampall ri tiùb centrifuge gun RNase (air a dhèanamh suas le PBS no 0.9% NaCl gun fhios nach eil sampall gu leòr ann), cuir 500 μl de Buffer VL ris, measgachadh gu math le bhith a’ vortexing airson 15 - 30 diog, agus centrifuge goirid gus am measgachadh a chruinneachadh aig bonn an tiùba.
2. Cuir Colbhan RNA FastPure ann an Tiùban cruinneachaidh 2 ml.Cuir thairis am measgachadh bho Cheum 1 gu FastPure RNA Colbhan, centrifuge aig 12,000 rpm (13,400 × g) airson 1 min, agus cuir air falbh an sìoltachan.
3. Cuir 600 μl de Buffer RW gu FastPure RNA Colbhan, centrifuge aig 12,000 rpm (13,400 × g) airson 30 diog, agus cuir às don fhileadh.
4. Dèan a-rithist Ceum 3.
5. Centrifuge an colbh falamh aig 12,000 rpm (13,400 × g) airson 2 min.
6. Gluais gu faiceallach Colbhan FastPure RNA a-steach do phìoban cruinneachaidh ùr gun RNase 1.5 ml (air a sholarachadh sa phasgan), agus cuir 30 - 50 μl de ddH2O gun RNase gu meadhan na membran gun a bhith a’ beantainn ris a ’cholbh.Leig leotha seasamh aig teòthachd an t-seòmair airson 1 min agus centrifuge aig 12,000 rpm (13,400 × g) airson 1 min.
7. Cuir às do cholbhan RNA FastPure.Faodar an DNA / RNA a chleachdadh gu dìreach airson measaidhean às deidh sin, no a stòradh aig -30 ~ -15 ° C airson ùine ghoirid no -85 ~ -65 ° C airson ùine nas fhaide.
Notaichean
Airson cleachdadh rannsachaidh a-mhàin.Chan ann airson a chleachdadh ann am modhan breithneachaidh.
1. Cothromaich samples gu teòthachd an t-seòmair ro-làimh.
2. Tha bhìorasan gu math gabhaltach.Dèan cinnteach gun gabh thu a h-uile ceum sàbhailteachd riatanach ron deuchainn.
3. Seachain reothadh is leaghadh an t-sampall a-rithist, oir dh'fhaodadh seo leantainn gu truailleadh no lùghdachadh ann an toradh an DNA/RNA viral a chaidh a thoirt a-mach.
4. Tha uidheamachd fèin-ullaichte a’ toirt a-steach molaidhean pìobaireachd gun RNase, tiùban centrifuge gun RNase 1.5 ml, centrifuge, measgachadh vortex, agus pìoban.
5. Nuair a bhios tu a' cleachdadh a' phiseag, cuir ort còta obair-lann, miotagan latex cuidhteasach, agus masg cuidhteasach agus cleachd stuthan consum gun RNase gus an cunnart bho thruailleadh RNase a lùghdachadh.
6. Dèan a h-uile ceum aig teòthachd an t-seòmair mura h-eilear ag ràdh a chaochladh.
Uidheam & Sruth-obrach
