DNase I (Rnase Free)(5u/ul)
Àireamh cat: HC4007A
Tha DNase I (Deoxyribonuclease I) na endodeoxyribonuclease as urrainn DNA singilte no dà shreath a chnàmh.Bidh e ag aithneachadh agus a’ ceangal bannan phosphodiester gus monodeoxynucleotides no oligodeoxynucleotides le sreathan singilte no dà-fhillte a thoirt gu buil le buidhnean fosfáit aig an 5’-terminal agus hydroxyl aig an 3’-terminal.Tha gnìomhachd DNase I an urra ri Ca2+agus faodar a chuir an gnìomh le ions meatailt divalent leithid Mn2+agus Zn2+.5 mM Ca2+a 'dìon an enzyme bho hydrolysis.Ann an làthair Mg2+, dh'fhaodadh an enzyme làrach sam bith aithneachadh agus a ghlanadh air sreath DNA sam bith.Ann an làthair Mn2+, faodar na sreathan dùbailte de DNA aithneachadh aig an aon àm agus an glanadh aig cha mhòr an aon làrach gus pìosan DNA deireadh rèidh a chruthachadh no pìosan DNA deireadh steigeach le 1-2 nucleotides a’ sruthadh a-mach.
Co-phàirtean
| Ainm | 0.1KU | 1KU | 5 KU | 50 KU |
| DNase I, saor bho RNase | 20 μL | 200 μL | 1 ml | 10 ml |
| 10 × DNase I Bufair | 1 ml | 1 ml | 5 × 1mL | 5 × 10 mL |
Suidheachadh stòraidh
-25 ℃ ~ -15 ℃ airson stòradh;Còmhdhail fo phasgan deigh.
Stiùiridhean
1. Ullaich am fuasgladh freagairt anns an tiùb gun RNase a rèir nan cuibhreannan a tha air an liostadh gu h-ìosal:
| Comh-phàirt | Toirt |
| RNA | X µg |
| 10 × DNase I Bufair | 1 µL |
| DNase I, gun RNase (5U/μL) | 1 U gach µg RNA① |
| dhh2O | Suas gu 10 μL |
Nota: ① Obraich a-mach meud DNase I a dh’ fheumar a chur ris a rèir na tha de RNA.
2. 37 ℃ airson 15 mionaidean;
3. Cuir 0.5M EDTA ris a' chuibhreann mu dheireadh de 2.5mM~5mM, agus teas aig 65 ℃ airson 10 mionaidean gus stad a chur air an fhreagairt.Faodar an sampall a chleachdadh gu dìreach airson an ath fhreagairt leithid tar-sgrìobhadh cùildeuchainn.
Mìneachadh Aonad
Tha aon aonad air a mhìneachadh mar an ìre de einnsein a dh’ ìsleas gu tur 1µg de pBR322DNA ann an 10 mionaidean aig 37 ℃.
Smachd Càileachd
RNase:Chan eil 5U de DNase I le 1.6µg MS2 RNA airson 4 uairean aig 37 ℃ a’ toirt a-mach truailleadh sam bith marair a dhearbhadh le electrophoresis gel agarose.
Notaichean
1. Feuch an ullaich thu 0.5MEDTA leat fhèin.
2. Cleachd 1U DNase I gach µg de RNA.Ach, ma tha an RNA nas lugha na 1µg, feuch an cleachd thu 1U DNase I.
3. Feuch an cuir thu an enzyme air deigh rè obrachadh.
