2 × HiF Taq a bharrachd air Master Mix
Cat Àireamh: HCR2014B
Tha HIF Taq plus Master Mix (With Dye) na fhuasgladh deiseil 2 × ro-mheasgaichte anns a bheil Plus HIF DNA Polymerase, dNTPs, agus bufair làn-leasaichte.Tha dà antibodies monoclonal aig teòthachd an t-seòmair a chuireas bacadh air gnìomhachd polymerase agus gnìomhachd 3 ′ → 5 ′ exonuclease air an cur ris a ’phrìomh mheasgachadh airson Hot Start PCR a tha furasta agus sònraichte.Tha am bàillidh leudachaidh air a chur ris a’ phrìomh mheasgachadh gus comas leudachaidh criomag fhada a thoirt don enzyme, faodaidh fad an leudachaidh a bhith suas ri 13 kb, tha gnìomhachd DNA polymerase 5 ′ → 3 ′ aig an enzyme agus 3 ′ → 5 ′ gnìomhachd exonuclease, tha a dhìlseachd 83 uair nas àirde na Taq DNA polymerase, a tha 9 tursan nas àirde na DNA polymerase àbhaisteach.Tha e freagarrach airson leudachadh air teamplaidean iom-fhillte, tha an toradh leudachaidh na cheann maol.
Tha na buannachdan aig 2 × HIF Taq a bharrachd air Master Mix (With Dye) airson luath agus furasta, cugallachd àrd, sònraichteachd làidir, deagh sheasmhachd, msaa, chan fheum an siostam freagairt ach primers agus teamplaidean a chuir ris, agus faodar a mheudachadh le dà- protocol ceum, a 'sìmpleachadh nan ceumannan deuchainneach agus a' sàbhaladh ùine.Anns an toradh seo tha dathan comharran electrophoresis, agus faodar toraidhean PCR a chleachdadh gu dìreach airson electrophoresis.A bharrachd air an sin, tha àidseant dìon sònraichte anns an toradh cuideachd, gus an urrainn don phrìomh mheasgachadh gnìomhachd seasmhach a chumail às deidh reothadh a-rithist.
Cumhachan stòraidh
Bu chòir bathar a stòradh aig -25 ~ -15 ℃ airson 1 bhliadhna.
Sònrachaidhean
| Sònrachadh toraidh | Maighstir measgachadh |
| dùmhlachd | 2 × |
| Tòisich teth | Toiseach tòiseachaidh teth togte |
| Crochadh thairis | Blàth |
| Astar freagairt | Gu luath |
| Meud (Bathar Deireannach) | Suas gu 13kb |
| Riatanasan airson còmhdhail | Deigh thioram |
| Seòrsa toraidh | Premixes PCR àrd-dhìlseachd |
Stiùiridhean
1.Siostam freagairt PCR
| Co-phàirtean | Meud (μL) |
| Teamplaid DNA | Freagarrach |
| Thoir air adhart primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| Reverse Primer (10 μmol/L) | 2.5 |
| 2 × HIF Taq a bharrachd air Master Mix | 25 |
| dhh2O | gu 50 |
2.Thathas a’ moladh cleachdadh diofar theamplaidean
| Seòrsa teamplaid | Meudaich pìosan bho 1kb gu 10 kb |
| DNA genomic | 50ng-200 ng |
| DNA plasma no bhìorasach | 10pg-20ng |
| cDNA | 1-2.5 µL (Na bi nas àirde na 10% den tomhas freagairt PCR mu dheireadh) |
3.Pròtacal leudachaidh
1) Pròtacal dà-cheum (teamplaid iom-fhillteachd)
| Ceum rothaireachd | Temp. | Uair | Rothaichean |
| Dì-nàdarachadh tùsail | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Dì-nàdarachadh | 98 ℃ | 10 diog | 30-35 |
| Leudachadh | 68 ℃ | 30 diog/kb | |
| Leudachadh deireannach | 72 ℃ | 5 min | 1 |
2) Pròtacal trì-cheum (pròtacal cunbhalach)
| Ceum rothaireachd | Temp. | Uair | Rothaichean |
| Dì-nàdarachadh tùsail | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Dì-nàdarachadh | 98 ℃ | 10 diog | 30-35 |
| Annealing | 60 ℃ | 20 diog | |
| Leudachadh | 72 ℃ | 30 diog/kb | |
| Leudachadh deireannach | 72 ℃ | 5 min | 1 |
3) Pròtacal caisead annealing (teamplaid iom-fhillteachd)
| Ceum rothaireachd | Teòthachd | Uair | Rothaichean |
| Dì-nàdarachadh tùsail | 98 ℃ | 3 min | 1 |
| Dì-nàdarachadh | 98 ℃ | 10 diog | 15 (Lùghdachadh 1 ℃ gach cearcall) |
| Annealing caisead | 70-55 ℃ | 20 diog | |
| Leudachadh | 72 ℃ | 30 diog/kb | |
| Dì-nàdarachadh | 98 ℃ | 10 diog |
20 |
| Annealing | 55 ℃ | 20 diog | |
| Leudachadh | 72 ℃ | 30 diog/kb | |
| Leudachadh deireannach | 72 ℃ | 5 min | 1 |
Feartan fo phròtacal leudachaidh eadar-dhealaichte
| Pròtacall | Dà-cheum | Trì-cheum | Annealing caisead |
| Spec. | luath | meadhanach | slaodach |
| Sònrachadh | àrd | meadhanach | àrd |
| Toradh PCR | meadhanach | àrd | meadhanach |
| Ìre lorgaidh | àrd | meadhanach | àrd |
Notaichean
Feuch an cuir thu ort am PPE riatanach, a leithid de chòta obair-lann agus miotagan, gus dèanamh cinnteach à do shlàinte is sàbhailteachd!
