Aon cheum RT-qPCR SYBR Green Premix
Àireamh cat: HCB5140A
One Step RT-qPCR Tha Syber Green Premix airson tomhas fluorescence stèidhichte air dath SYBR Green I.Le bhith a’ cleachdadh primers gine-sònraichte, tha tar-sgrìobhadh cùil agus ath-bheachdan qPCR air an crìochnachadh ann an aon phìob, a’ cur às don fheum air ath-fhosgladh caiptean agus obair pìobaireachd, a’ leasachadh èifeachdas assay gu mòr agus a’ lughdachadh cunnart truailleadh.Airson sampallan RNA, bidh an uidheamachd a’ cleachdadh Reverse Transcriptase a tha an aghaidh teas airson synthesis cDNA èifeachdach agus HotStart Taq DNA Polymerase airson leudachadh cainneachdail.Fon t-siostam bufair làn-leasaichte, faodaidh cugallachd a’ chit a bhith cho àrd ri 0.1 pg airson targaidean a tha air an cur an cèill gu mòr agus cho àrd ri 1 pg airson targaidean meadhanach soilleir.Tha am pasgan freagarrach airson leudachadh agus àireamhachadh sampallan DNA.Leigidh e le bhith a’ lorg agus a’ tomhas searbhagan niuclasach bho dhiofar shamhlaichean planntrais is bheathaichean, ceallan agus meanbh-fhàs-bheairtean.
Co-phàirtean
| No | Ainm | Toirt | Toirt |
| 1 | Bufair adhartach | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
| 2 | Measgachadh Enzyme Adhartach | 20 μL | 200 μL |
| 3 | RNase an-asgaidh H2O | 250 μL | 2 × 1.25 mL |
Cumhachan stòraidh
Bu chòir an toradh seo a stòradh aig -25 ~ -15 ℃ air falbh bho sholas airson 1 bliadhna.
Stiùiridhean
rèiteachadh siostam 1.Reactiond
| Co-phàirtean | Meud (μL) | Meud (μL) | Co-chruinneachadh deireannach |
| Bufair adhartach | 12.5 | 25 | 1 × |
| Measgachadh Enzyme Adhartach | 1 | 2 | - |
| Air adhart Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Reverse Primer (10 μmol/L)a | 0.5 | 1 | 0.2 μmol/L |
| Teamplaid RNAb | X | X | - |
| RNase an-asgaidh H2Oc | gu 25 | gu 50 | - |
Notaichean:
1) a.Tb’ e an dùmhlachd primer mu dheireadh aige 0.2 μmol / L, a ghabhadh atharrachadh cuideachd eadar 0.1 agus 1μmol / L mar a bhios iomchaidh.
2) b.Tha an reagent air leth mothachail, le RNA Iomlan anns an raon de 1pg-1μg, agus sheall deuchainn air sampallan daonna an cuir a-steach as fheàrr de 1 pg-100 ng, a’ cumail smachd air luach Ct iomlan anns an raon de 15-30 mar a bhios iomchaidh.
3) c.Thathas a’ moladh 20μL no 50μL a chleachdadh gus dèanamh cinnteach à dligheachd agus ath-riochdachadh leudachadh gine targaid.
4) d.Feuch an ullaich thu anns a’ bheing ultra-ghlan agus cleachd molaidhean gun fuigheall nuclease agus tiùban freagairt;Thathas a’ moladh molaidhean le cartan sìoltachain.Seachain tar-thruailleadh agus truailleadh aerosol.
2.Prògram freagairt
| Ceum rothaireachd | Temp. | Uair | Rothaichean |
| Ath-sgrìobhadh air ais | 50 ℃a | 6 mionaidean | 1 |
| Dì-nàdarachadh tùsail | 95 ℃ | 5 mionaidean | 1 |
| Freagairt leudachaidh | 95 ℃ | 15 diog | 40 |
| 60 ℃b | 30 diog | ||
| Ìre lùbte leaghaidh | Diofar innealan | 1 | |
Notaichean:
1) a.Faodar an teòthachd tar-chuir cùil a thaghadh eadar 50-55 ° C a rèir feumalachdan deuchainneach.Airson sampallan DNA, faodar am pròiseas tar-sgrìobhaidh cùil fhàgail air falbh.
2) b.Ann an cùisean sònraichte faodar an teòthachd annealing / leudachaidh atharrachadh a rèir luach primer Tm, thathas a’ moladh 60 ° C.
Notaichean
1. Tha an toradh seo airson cleachdadh rannsachaidh a-mhàin.
2. Feuch an obraich thu le còtaichean obair-lann agus miotagan cuidhteasach, airson do shàbhailteachd.
