Poly A Carrier RNA

Cat Àireamh: HC4001A

Tha poly A, polyadenylate, na mheasgachadh de 100 ~ 10000 polyadenylates, a tha air a polymerized le polynucleotide phosphorylase in vitro.Ann am vivo, tha poly (a) air a chur ris an 3-terminal de mRNA le enzyme gus seasmhachd mRNA a leasachadh.Ann a bhith a’ cur a-mach às-tharraing searbhag niuclasach, le bhith a’ cur poly A ris an lysate no am fuasgladh ceangail faodaidh sin toradh DNA agus RNA a leasachadh.An uidheamde poly A a’ leasachadh toradh searbhag niuclasach mar a leanas:

1. Saturated conaltradh le uachdar adsorption artaigilean.Tha dealan statach aig a’ mhòr-chuid de artaigilean polypropylene air an uachdar, a bhios a’ sùghadh searbhagan niuclasach.Faodaidh RNA giùlain iad sin a shàthadhbuaidhean assorption agus lughdaich call aigéid niuclasach targaid.

2. Inactivate trace nucleases: Tha diofar nucleases ann bith-eòlasach sampaill agusàrainneachd.Faodaidh Poly A lorg nucleases a chuir an gnìomh anns na ceumannan às-tharraing no gleidheadh ​​​​guleasachadh a thoirt air toradh agus seasmhachd searbhagan niuclasach targaid.

3. Coprecipitation: Anns a’ cheum glanaidh searbhag niuclasach de fhrasadh no ceangaltach le deoch-làidir, faodaidh poly A coprecipitate leis an searbhag niuclasach targaid no gràinean polymer a chruthachadh guath-bheothachadh a leasachadh.

Modh cleachdaidh

Gabh meud iomchaidh de phùdar lyophilized, cuir uisge air a làimhseachadh le DEPC no fuasgladh salainn guanidine gusgaoil e gu 0.1-1ug / uL, agus an uairsin fo-phacaich e agus stòraich e aig -20 ° C.

Iarrtasan

1.Virus DNA/RNA às-tharraing: Le bhith a’ cur 1-5ug Carrier RNA ris an lysate faodaidh sin toradh RNA/DNA a leasachadh, an t-searbhag niuclasach targaid a dhèanamh seasmhach agus seachain an t-searbhag niuclasach ghlan aig àm stòraidh.

2. Anns an tarraing a-mach meanbh-DNA/RNA le modh membran colbh (<1ug), le bhith a' cur RNA neach-giùlain gu 1-5ug tha e cuideachail toradh searbhag niuclasach a leasachadh.

3. Anns a' cheum frasadh agus dùmhlachd searbhag niuclasach le deoch-làidir, tha cur-ris RNA neach-giùlain 1-2ug na chuideachadh gus faighinn air ais RNA earrann ghoirid.

4. Ann am fuasgladh ath-bhualadh cainneachdail PCR, tha cuir RNA giùlan 10-100ng ris an fhuasgladh ath-bhualadh cuideachail gus cugallachd a leasachadh agus lughdachadh C._Tluach.