DNase I (Rnase Free) (2u/ul)
Àireamh cat: HC4007B
Is e endonuclease a th’ ann an DNase I as urrainn DNA aon-shreath no dà-shreath a chnàmh.Faodaidh e bannan fosphodiester a uisgeachadh gus mono-agus oligodeoxynucleotides a dhèanamh anns a bheil buidheann 5'-phosphate agus buidheann 3'-OH.Is e an raon pH obrach as fheàrr de DNase I 7-8.Tha gnìomhachd DNase I an urra ri Ca2+agus faodar a chuir an gnìomh le ions meatailt divalent leithid CO2, Mn2+, Zn2+, etc Ann an làthair Mg2+, DNase Is urrainn dhomh làrach sam bith de DNA dà-shreath a ghlanadh air thuaiream;Fhad 's a bha e an làthair Mn2+, DNase Is urrainn dhomh DNA dà-shreath a ghleusadh aig an aon làrach, a’ cruthachadh cinn mhaol no cinn steigeach le 1-2 nucleotides a’ sruthadh a-mach.Faodar a chleachdadh airson diofar shampaill RNA a ghiullachd.
Co-phàirtean
Ainm | 1KU | 5KU |
Recombinant DNaseI (gun RNase) | 500 μL | 5 × 500 μL |
Bufair freagairt DNase I (10 ×) | 1 ml | 5 × 1mL |
Suidheachadh stòraidh
Bu chòir an toradh seo a stòradh aig -25 ~ -15 ℃ airson 2 bhliadhna.Feuch an seachain thu reothadh a-rithist.
Stiùiridhean
An sàs ann a bhith a’ toirt air falbh DNA bho shamhlaichean RNA airson fiosrachadh a-mhàin.
1. Feuch an cleachd thu pìoban centrifuge gun RNase agus molaidhean pìobaireachd gus an siostam ath-bhualadh a leanas ullachadh:
Co-phàirtean | Meud (μL) |
Bufair freagairt DNase I (10 ×) | 1 |
Recombinant DNasel (gun RNase) | 1 |
RNA | X |
Gun RNase ddH2O | Suas gu 10 |
2. Tha na cumhaichean freagairt mar a leanas: 37 ℃, an dèidh 15-30 mion, cuir a-steach co-chruinneachadh deireannach de fhuasgladh EDTA 2.5 mM agus measgachadh gu math, an uairsin 65 ℃ airson 10 mion.Faodar an teamplaid pròiseasaichte a chleachdadh airson deuchainnean RT-PCR no RT-qPCR às deidh sin, msaa.
Notaichean
1. Tha DNase l mothachail do dhì-nàdarachadh corporra;Nuair a bhios tu a’ measgachadh, cuir air ais an tiùb deuchainn gu socair aguscrathadh gu math, na bi a 'crathadh gu làidir.
2. Bu chòir an enzyme a stòradh ann am bogsa deigh no air amar deigh nuair a thèid a chleachdadh, agus bu chòir a stòradh aig -20 ℃ dìreach às deidh a chleachdadh.
3. Tha an toradh seo airson cleachdadh rannsachaidh a-mhàin.
4. Feuch an obraich thu le còtaichean obair-lann agus miotagan cuidhteasach, airson do shàbhailteachd.