Ultra Nuclease-ìre GMP
Cat Àireamh: HC2016A
Tha ìre UltraNuclease GMP air a chuir an cèill agus air a ghlanadh ann an Escherichia coli (E.coli) le innleachadh ginteil agus ullachadh fo àrainneachdan GMP.Faodaidh e lùghdachadh a dhèanamh air slaodachd supernatant cealla agus lysate cealla ann an rannsachadh saidheansail, àrdachadh èifeachdas glanaidh pròtain agus àrdachadh rannsachadh gnìomh pròtain.Faodaidh an toradh cuideachd fuigheall searbhag niuclasach aoigheachd a lughdachadh gu ìre pg, ag adhartachadh coileanadh agus sàbhailteachd thoraidhean bith-eòlasach thagraidhean a’ toirt a-steach glanadh bhìoras, saothrachadh banachdach, agus saothrachadh cungaidh pròtain / polysaccharide.A bharrachd air an sin, faodar an toradh a chuir an sàs cuideachd gus casg a chuir air cruinneachadh cheallan mononuclear fala iomaill daonna (PBMC) ann an leigheas cealla agus leasachadh banachdach.
Tha UltraNuclease air a thoirt seachad ann an cruth reagent sterilized, air a lughdachadh ann am bufair (20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin), le coltas leaghan gun dath, follaiseach.Tha an toradh seo air a thoirt a-mach a rèir riatanasan pròiseas GMP agus air a thoirt seachad ann an cruth lionn.
Co-phàirtean
Ìre GMP UltraNuclease (250 U/μL)
Cumhachan stòraidh
Tha an toradh air a chuir air falbh le deigh thioram agus faodar a stòradh aig -25 ℃ ~ -15 ° C airson dà bhliadhna.
Ma thèid an toradh fhosgladh agus a bhith air a stòradh aig 4 ℃ airson còrr air seachdain, tha sinn a ’moladh sìoladhan toradh gus casg a chuir air truailleadh microbial.
Sònrachaidhean
| Host Express | E. coli ath-chuimseach le gine UltraNuclease |
| Cuideam Molecular | 26.5 kDa |
| puing so-dealain | 6.85 |
| Purity | ≥99% (SDS-DUILLEAG) |
| Bufair stòraidh | 20mM Tris-HCL pH 8.0, 2mM MgCl, 20 mM NaCl, 50% glycerin |
|
Mìneachadh Aonad | Is e am mìneachadh air aon aonad gnìomhachd (U) an ìre de enzyme a chleachdaratharraich luach in-ghabhail ΔA260 le 1.0 ann an 30 mionaid ann an 2. 625 mLsiostam freagairt aig 37 ℃ le pH de 8.0 (co-ionann ri cnàmhadh iomlanDNA de sperm bradan 37 μg gu oligonucleotides). |
Stiùiridhean
1. Sampall Cruinneachadh
Ceallan ceangailte: thoir air falbh am meadhan, nigh na ceallan le PBS, agus thoir air falbh an supernatant.
Ceallan crochaidh: cruinnich na ceallan le centrifugation, nigh na ceallan le PBS, centrifuge aig 6,000rpm airson 10 mionaidean, cruinnich am peileag.
Escherichia coli: cruinnich na bacteria le centrifugation, nigh aon uair le PBS, centrifuge aig 8,000rpm airson 5 min, agus cruinnich am peileag.
2. Làimhseachadh sampall
Dèilig na cruinneagan cealla cruinnichte le bufair lysis aig a’ cho-mheas de tomad (g) gu tomhas-lìonaidh (mL) 1: (10-20), no le dòighean meacanaigeach no ceimigeach air deigh no aig teòthachd an t-seòmair (tha timcheall air 1g de pellet cealla
109 cealla).
3. Làimhseachadh Enzyme
Cuir 1-5mM MgCl ris an t-siostam ath-bhualadh agus atharraich am pH gu 8-9.
Cuir UltraNuclease a rèir a’ cho-mheas de 250 Aonad gus 1 g de pheilearan cealla a chnàmh, goir aig 37 ℃ airson còrr air 30 mionaid.Feuch an toir thu sùil air an fhoirm “Àm freagairt air a mholadh” gus anfad an làimhseachaidh.
4. Supernatant Cruinneachadh
Centrifuge aig 12,000 rpm airson 30 mionaid agus cruinnich an supernatant.
Nota: Ma tha am fuasgladh searbhagach no alcaileach, no ma tha tòrr salainn ann, innealan-glanaidh, nodenaturants, feuch an àrdaich thu an dosachadh enzyme no leudaich an ùine làimhseachaidh a rèir sin.
Conditi freagairt a thathar a’ moladhons
| Paramadair | An suidheachadh as fheàrr | Suidheachadh Èifeachdach |
| Mg²+ dùmhlachd | 1-5 mM | 1-10 mM |
| pH | 8-9 | 6-10 |
| Teòthachd | 37 ℃ | 0-42 ℃ |
| DTT dùmhlachd | 0-100 mM | > 0 mM |
| Co-chruinneachadh Mercaptoethanol | 0-100 mM | > 0 mM |
| Co-chruinneachadh Cation Monovalent | 0-20 mM | 0-150 mM |
| Phosphate lon dùmhlachd | 0-10 mM | 0-100 mM |
Air a mholadh Freagairt Uair (37 ℃, 2 mM Mg²+, pH 8.0)
| Suim UltraNuclease (Tùsachadh Deireannach) | Àm Reaction |
| 0.25 u/mL | > 10 h |
| 2.5 u/mL | >4 uair |
| 25 u/mL | 30 mionaid |
Notaichean:
Feuch an cuir thu ort am PPE riatanach, a leithid de chòta obair-lann agus miotagan, gus do shlàinte is do shàbhailteachd a dhèanamh cinnteach!
